Cette technique est similaire à la précédente jusqu’à la phase de laboratoire, où la fécondation s’effectue par « Injection intracytoplasmique de spermatozoïdes » (ICSI).
> Technique ICSI
La micro-injection sera effectuée sur des ovocytes qui ont une maturation correcte (environ 80%), c’est-à-dire ceux qui sont au stade de la métaphase II. Pour ce faire, nous devons les libérer des cellules qui les entourent. Ce processus est connu sous le nom de dénudation.
A l’aide d’un micromanipulateur, nous effectuerons la micro-injection du sperme. Le microinjecteur se compose d’un microscope inversé (avec lequel nous pouvons observer les ovocytes et les spermatozoïdes à 400 grossissements) et de bras de microinjecteur. Avec l’un d’eux, l’ovocyte est fixé au micro-injecteur par aspiration, et avec l’autre bras hydraulique, le sperme est capturé et introduit dans l’ovocyte, facilitant ainsi la fécondation.
Par la suite, les ovocytes micro-injectés sont maintenus dans des conditions aussi proches que possible des conditions physiologiques. Pour ce faire, les ovocytes sont maintenus dans un incubateur, à une température stable de 37º C et 6% de CO2, jusqu’à ce que leur fécondation soit contrôlée 16-18 heures après ICSI. Après deux ou trois jours (jour +2 ou +3) après la fécondation (ICSI), les préembryons sont transférés dans l’utérus, et s’il y a des préembryons surnuméraires, ils peuvent être cryopréservés pour un autre transfert, évitant ainsi de devoir à nouveau subir une stimulation. Dans les deux techniques, si nous obtenons des préembryons surnuméraires, ceux-ci peuvent être conservés en « culture prolongée » jusqu’au stade de blastocyste expansé, effectuant le transfert en jour +5 ou +6, nous permettant une meilleure sélection embryonnaire, et donc un plus grand nombre de grossesses.
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