Тази техника е подобна на предишната до лабораторната фаза, при която оплождането се извършва чрез „интрацитоплазмено инжектиране на сперматозоиди“ (ICSI).
Оплождане ин витро чрез ICSI
Техниката за IVF с използване на ICSI
Микроинжектирането ще се извърши в правилно узрели яйцеклетки (приблизително 80%), т.е. такива, които са в метафаза II. За целта трябва да ги освободим от заобикалящите ги клетки. Този процес е известен като „денудация“.
Използваме микроманипулатор, за да извършим микроинжектирането на сперматозоиди. Микроинжекторът се състои от обърнат микроскоп (с който можем да наблюдаваме яйцеклетките и сперматозоидите при увеличение до 400 пъти) и рамена на микроинжектора. Едното от тях се използва за придържане на яйцеклетката към микроинжектора чрез засмукване, а другото хидравлично рамо се използва за улавяне на сперматозоидите и въвеждането им в яйцеклетката, като по този начин се улеснява оплождането.
Методът
Впоследствие микроинжектираните яйцеклетки се държат в условия, които са възможно най-близки до физиологичните. Това се постига, като яйцеклетките се държат в инкубатор със стабилна температура от 37ºС и 6% CO2, докато се потвърди оплождането 16-18 часа след ICSI.
Два или три дни (ден +2 или +3) след оплождането (ICSI) преембрионите се прехвърлят в матката, а ако има свръхчовешки преембриони, те могат да бъдат криоконсервирани за друго прехвърляне, като по този начин се избягва повторната стимулация.
И при двете техники, в случай че се получат свръхчовешки преембриони, те могат да се държат в „удължена култура“ до стадия на разширена бластоциста, като трансферът се извършва на ден +5 или +6, което позволява по-добър подбор на ембрионите и следователно по-голям брой бременности.
