Tämä tekniikka on samanlainen kuin edellinen aina laboratoriovaiheeseen asti, jossa hedelmöitys tapahtuu ”intrasytoplasmisella sperman injektiolla” (ICSI).
In vitro -hedelmöitys ICSI:n avulla
IVF-tekniikka ICSI:n avulla
Mikroinjektio tehdään niihin munasoluihin, jotka ovat kypsyneet oikein (noin 80 %) eli jotka ovat metafaasi II -vaiheessa. Tätä varten meidän on vapautettava ne niitä ympäröivistä soluista. Tämä prosessi tunnetaan nimellä ”denudaatio”.
Käytämme mikromanipulaattoria siittiöiden mikroinjektioiden tekemiseen. Mikroinjektori koostuu käännetystä mikroskoopista (jolla voidaan tarkastella munasoluja ja siittiöitä jopa 400-kertaisella suurennoksella) ja mikroinjektorin varret. Toista niistä käytetään pitämään munasolua mikroinjektorissa imun avulla, ja toista hydraulista käsivartta käytetään siemennesteen vangitsemiseen ja sen tuomiseen munasoluun, mikä helpottaa hedelmöittymistä.
Menetelmä
Tämän jälkeen mikroinjektoituja munasoluja pidetään mahdollisimman lähellä fysiologisia olosuhteita. Tämä saavutetaan pitämällä munasoluja inkubaattorissa, jonka lämpötila on vakaa 37º C ja hiilidioksidipitoisuus 6 %, kunnes hedelmöittyminen on varmistettu 16-18 tuntia ICSI:n jälkeen.
Kaksi tai kolme päivää (päivä +2 tai +3) hedelmöityksen (ICSI) jälkeen esihedelmöitykset siirretään kohtuun, ja jos esihedelmöityksiä on ylimääräisiä, ne voidaan kryosäilyttää toista siirtoa varten, jolloin vältytään uudelta stimulaatiolta.
Molemmissa tekniikoissa, jos saadaan ylimääräisiä esialkioita, niitä voidaan pitää ”pidennetyssä viljelyssä” laajennettuun blastokystavaiheeseen asti, jolloin siirto voidaan suorittaa +5. tai +6. päivänä, mikä mahdollistaa paremman alkioiden valinnan ja siten suuremman raskauksien määrän.
